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Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú

versión impresa ISSN 1609-9117

Rev. investig. vet. Perú vol.29 no.3 Lima jul./set. 2018

http://dx.doi.org/10.15381/rivep.v29i3.14758 

ARTÍCULOS PRIMARIOS

 

Comparación de la concentración del factor de crecimiento transformante Beta 1 (TGF-β1) en líquido sinovial de perros con y sin enfermedad degenerativa articular

Comparison of the concentration of the transforming growth factor beta 1 (tgf-β1) in synovial fluid of dogs with and without degenerative joint disease

 

Christof Fischer Wiethuchter1,3, Valentina Lepe2, Álvaro Opazo1, Álvaro Luzio1, Ignacio Troncoso 1, Carolina Hernandez1

1 Escuela de Medicina Veterinaria, Sede Concepción, Universidad Santo Tomás, Chile

2 Centro Veterinario Alemán Kleintierklinik, Concepción, Chile

3 E-mail: cfischer@santotomas.cl


RESUMEN

La enfermedad degenerativa articular (EDA) es una patología de carácter no inflamatorio en su origen, que se caracteriza en ser progresiva, estructural y funcional. El factor de crecimiento transformante Beta 1 (TGF-β1) es una citocina reguladora en la producción y depósito de matriz extracelular en varios tejidos, incluyendo el cartílago articular. El objetivo del presente estudio fue comparar las concentraciones del factor de crecimiento transformante β1 en líquido sinovial de caninos con (n=12) y sin EDA (n=11), determinado mediante una prueba de ELISA. La concentración media de TGB-β1 en perros sin EDA fue de 16.8 ± 7.1 ng/ml, mientras que en perros con EDA fue de 10.3 ± 3.5 ng/ml (p<0.05).

Palabras clave: factor de crecimiento transformante β1; líquido sinovial; caninos


ABSTRACT

Degenerative joint disease (DJD) is a non-inflammatory pathology and characterized to be progressive, structural, and functional. The transforming growth factor Beta 1 (TGF-β1) is a regulatory cytokine participating in the production and deposition of extracellular matrix in various tissues, including joint cartilage. The aim of the present study was to compare the concentrations of transforming growth factor β1 in canine synovial fluid with (n=12) and without DJD (n=11), determined by an ELISA test. The mean concentration of TGB-β1 in dogs without DJD was 16.8 ± 7.1 ng/ml, while in dogs with DJD it was 10.3 ± 3.5 ng/ml (p <0.05).

Key words: transforming growth factor β1; synovial fluid; canines


INTRODUCCIÓN

La Enfermedad Degenerativa Articular (EDA) es la artropatía no inflamatoria más frecuente en los seres humanos y animales; es una alteración de las articulaciones móviles y desde el punto de vista macroscópico se caracteriza por la fragmentación y pérdida del cartílago articular y radiográficamente por estrechamiento del espacio articular, esclerosis del hueso subcondral, remodelación ósea, osteofitos en los márgenes articulares y entesiofitos en el sitio de inserción de tejidos blandos (Ettinger y Feldman, 2002). Las causas primarias de esta enfermedad se producen en animales que han realizado actividad física en exceso, asociado con el envejecimiento. La EDA secundaria es mucho más frecuente y se produce como secuela postraumática o seguida a desórdenes en la estabilidad. Como consecuencia de estas causas se producen cambios biomecánicos y bioquímicos que alteran los componentes de la articulación. Comienza con un deterioro del cartílago articular, con fisuras y pérdidas cartilaginosas, especialmente en zonas donde sufren mayor presión, para luego producirse sinovitis, esclerosis del hueso, engrosamiento de la cápsula articular y formación de osteofitos (Brusa y Boccia, 2000).

Lasinovia esunlíquidodializado delplasma de color transparente o amarillento, altamente viscoso por su contenido de ácido hialurónico y glucoaminoglicanos producidos por las células sinoviales de la articulación (Wittwer, 2012). Este líquido baña las estructuras articulares en el interior de la cavidad sinovial. Sus principales funciones son la nutrición y lubricación del cartílago articular (Chico et al., 1995); asimismo, participa en la eliminación de desechos provenientes del metabolismo de los condrocitos (Richardson, 1982).

Los factores de crecimiento son un conjunto de sustancias de naturaleza peptídica, cuya misión es la comunicación intercelular a nivel molecular. Son capaces de modificar las respuestas biológicas celulares, ya que regulan la migración, proliferación, diferenciación, y metabolismo celular, e incluso la apoptosis (Peñarrocha et al., 2001). En condiciones fisiológicas, las plaquetas liberan el factor de crecimiento transformante β1 (TGF-β1), entre otros, que modula la inflamación y la reparación de heridas (Sutter et al., 2004, Argüelles et al., 2006).

En Medicina Humana existen pocos estudios que reportan la concentración del TGF-β1 en líquidos sinoviales presentes en artropatías. Fava et al. (1989) reportaron los casos de nueve pacientes con artritis reumatoide, cuatro con osteoartritis, dos con gota y uno con necrosis avascular, cuyas concentraciones de TGF-β en los fluidos sinoviales fueron de 10.1, 3.8 y 8.0 ng/ml y sin actividad detectable, respectivamente. No se han encontrado estudios relacionados con concentración del TGF-β1 en líquido sinovial y la comparación de este factor en caninos con y sin enfermedad degenerativa articular.

El objetivo de esta investigación fue comparar la concentración de TGF-β1 en el líquido sinovial, en caninos con y sin enfermedad degenerativa articular, para una mejor comprensión del proceso de la degeneración articular en perros.

MATERIALES Y MÉTODOS

El presente estudio se realizó en el Hospital Veterinario de la Universidad Santo Tomás, sede Concepción, ubicado en la ciudad de Concepción, VIII región, Chile. Se utilizaron 23 caninos adultos, sin distinción de sexo, ni raza, los cuales fueron divididos en dos grupos (grupo 1, sin EDA [n=11]; grupo 2, con EDA [n=12]). El criterio de selección para el grupo 1 fue que no presentasen alteraciones en el hemograma y estar clínicamente sanos al momento de la toma de muestra; es decir, constantes fisiológicas normales como temperatura (38.1-39.2 °C), frecuencia respiratoria (10-30 resp/min), frecuencia cardíaca (60-160 lat/min) y tiempo de llenado capilar (1-2 s) (Mendoza, 2011), además de no presentar alteraciones ortopédicas y radiológicas articulares al momento de realizar el examen radiológico. En cambio, en los pacientes incluidos en el grupo 2 se confirmó un diagnóstico ortopédico y radiológico de EDA al momento de la recolección de sangre y de líquido sinovial.

El examen ortopédico consistió en evaluar al paciente en descanso, caminando, trotando y la reexaminación tras el ejercicio, además de pruebas ortopédicas como flexión, extensión y abducción de la articulación (Piermattei et al., 2007). Luego de realizar el examen ortopédico, se procedió a la evaluación radiográfica (Ecotron EPX-F3200 HF) en conjunto con un digitalizador (Carestream Vita Flex CR X-ray) con dos vistas de cada articulación, con el fin de determinar un deterioro del cartílago articular como fisuras y pérdidas cartilaginosas, especialmente en zonas donde sufren mayor presión, que pueden producir sinovitis, esclerosis del hueso, efusión articular y formación de osteofitos (Johnston, 1997). Con base a los signos radiológicos hallados, se determinó la presencia o ausencia de EDA (Impellizeri et al., 2000).

El líquido sinovial se extrajo de codo, cadera o rodilla, según la articulación afectada, con una jeringa de 10 ml con aguja de 18G, que se introdujo en la articulación para aspirar el fluido en forma aséptica (Figura 1). Se tuvo en cuenta que la presión negativa de la jeringa fuese liberada antes del retiro de la aguja de la articulación para evitar contaminación de la muestra (Figura 2). Esta fue depositada en un tubo con EDTA y centrifugada a 1500 rpm (101 g) por 5 minutos (Fischer et al., 2014). Para la determinación de TGF-β1 se empleó la técnica cuantitativa de inmunoensayo enzimático con un kit comercial específico para caninos (Quantikine® ELISA, Mouse/Rat/Porcine/ Canine TGF β1 Inmunoassay).

Para determinar si los datos presentaban distribución normal se utilizó la prueba de normalidad Shapiro-Wilk (S-W: p<0.05). Al no poseer distribución normal se utilizó la prueba de Mann-Whitney para determinar diferencias estadísticas. Se aceptó un valor de p<0.05 como diferencia significativa al realizar la comparación entre grupos.

RESULTADOS

La concentración de TGF-β1 en caninos con y sin EDA, según la prueba de ELISA, se muestra en el Cuadro 1. Los caninos sin EDA presentaron una concentración de 16.82 ± 7.12 ng/ml (promedio ± desviación estándar), mientras que en los caninos con EDA fue de 10.33 ± 3.50 ng/ml (p=0.01).

DISCUSIÓN

La concentración media de TGF-â1 para el grupo con EDA de 10.33 ng/ml fue significativamente menor que aquella en canes sin EDA (16.82 ng/ml), lo que demuestra lo indicado por Fava et al. (1989), que ante la presencia de una enfermedad degenerativa articular existe daño en la matriz del cartílago (Mc Ilwraith, 1982) y, con ello, lesiones en los condrocitos, los cuales son los que sintetizan la mayor parte de los TGF-β1.

Los condrocitos afectados tienen reducidas sus capacidades proliferativas (Dominice et al., 1986), lo cual indica que con la presencia de EDA se pierde el equilibrio entre el anabolismo y catabolismo del cartílago (Aspden et al., 2001), perdiéndose estructuras fundamentales como la matriz extracelular del cartílago (Blanco et al., 1998), el cual tiene funciones de contención importante para el condrocito (Sánchez, 2008).

CONCLUSIONES

Los perros que presentan enfermedad degenerativa articular tienen una menor concentración de TGF-β1 (10.32 ng/ml) que perros sanos (16.62 ng/ml).

 

LITERATURA CITADA

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Recibido: 28 de octubre de 2017

Aceptado para publicación: 22 de marzo de 2018